developement et optimisation d'un procede d'extraction hydro-ethanolique en vue d'une valorisation du potentiel

Abstract

Globularia alypum est une plante très utilisée dans la médecine traditionnelle en Algérie, connues sous le nom « Tasselgha », elle est très efficace dans le traitement de diverses maladies telles que le diabète, les maladies cardio-vasculaires et peut-être indiquée comme cicatrisante et antiseptique en plus de son effet antioxydant et antimicrobien, d’où l’intérêt de mener cette étude. Dans un premier lieu, nous avons réalisé une étude comparative de trois techniques d’extraction des composés phénoliques contenus dans les feuilles de Globularia alypum : extraction par macération (méthanol aqueux, 80 %), (éthanol aqueux, 80%) avec agitation (1300 (tour/min)) pendant 19 minutes, décoction (eau bouillante, 19 min) et infusion (eau chaude, 19 min). La comparaison a été portée sur : le rendement d’extraction des métabolites visés, screening phytochimique (test des colorations), dosage des composés phénoliques (Folin-Ciocalteu), des flavonoïdes (AlCl3) et des tannins condensés (Butanol-HCl avec FeSO4), en plus de l’activité antioxydante (par DPPH) et l’efficacité antibactérienne (par diffusion sur disque Agar) des extraits obtenus envers les souches (E-coli, Klebsiella Pneumoniae à gram négatif et Bacillus subtilis à gram positif). En d’autre part, on a opté pour une étude d’optimisation des paramètres opératoires (masse, agitation, temps) influençant l’extraction des polyphénols totaux par macération hydroéthanolique (80%) de la poudre des feuilles de Globularia alypum, suite à son efficacité qui est très proche de celle du méthanol aqueux (80%), moins chère et plus sûr. Par ailleurs, une analyse qualitative par chromatographie liquide à haute performance (HPLC) a été réalisée pour l’extrait optimal obtenu (éthanolique aqueux 80%), afin de vérifier les conditions opératoires de l’analyse chromatographique, puis, une séparation sur colonne chromatographique phase liquide (CPL) s’ensuive, pour obtenir une séparation des composés présents dans l’extrait, et enfin, une analyse par HPLC a été réalisée pour quelques fractions choisies (12,13), ce qui a mené à avoir un pic majoritaire (la surface du pic de la fraction 13 est largement supérieure à celui de la fraction 12), finalement, la méthode d’analyse de la fraction 13 a été validée par un coefficient de variation inférieur à 5% (excellent), ceci nous permet de conclure que la méthode utilisée est juste et fidèle (pics superposés).